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培養(yǎng)基 | H-4-II-E細胞專用培養(yǎng)基:89%EMEM+10%FBS+1%NEAA |
傳代方法 | 復蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃中取出放入 PE 手套中,迅速沒入 37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以 1 分鐘內(nèi)全部 溶解為宜;②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有 9ml 完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm/min 離心 5 分鐘,棄去 上清液,用 1-2mL 完全培養(yǎng)基重懸細胞。③然后將細胞懸液加入到含有 5-6mL 完全培養(yǎng)基的 T25 瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,PBS 清洗兩遍后,加入 1-2mL 胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況, 在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細胞層某處,肉眼可見細胞層脫落,即消化完成,否則繼續(xù) 消化),直接吸掉胰酶,加入 5-6 毫升完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。③將細胞懸液按 1:2 比例分到 新的 T25 瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。④注意培養(yǎng)基 pH 值變化和細胞密度,定期換 液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%-90%時,重復傳代操作或者凍存。 |
生長條件 | 培養(yǎng)溫度37℃;氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣; |
生長特性 | 貼壁生長 |
存儲條件 | 液氮 |
安全等級 | 0 |
形態(tài) | 上皮樣 |
應用領域 | 可誘導產(chǎn)生芳徑羥化酶,用于檢測環(huán)境樣品或食物提取物中皮克級的多氯聯(lián)苯有機化合物。 |
共享方式 | 公益性共享 |
證書下載 | 說明書文件 支原體檢測報告 |
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