北方偉業(yè)計量集團有限公司
培養(yǎng)基 | 90%RPMI-1640+10%FBS |
傳代方法 | 1.貼壁培養(yǎng)的細胞應(yīng)先處理為細胞懸液,然后10000rpm(11200g)離心1min,倒盡上清,加200μL緩沖液GA,振蕩至徹底懸??; 2.加入20μL Proteinase K溶液,混勻; 3.加入200μL緩沖液GB,充分顛倒混勻,70℃放置10min,溶液應(yīng)變清亮,簡短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠; 4.加人200μL無水乙醇,充分振蕩混勻15sec,此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀,簡短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠; 5.將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中),12000rpm(13400g)離心30sec,倒掉廢液,將吸附柱CB3放回收集管中; 6.向吸附柱CB3中加入500μL緩沖液GD(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm(13,400g)離心30sec,倒掉廢液,將吸附柱CB3放入收集管中; 7.向吸附柱CB3中加入600μL漂洗液PW(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm(13400g)離心30sec,倒掉廢液,將吸附柱CB3放入收集管中; 8.重復(fù)操作步驟7; 9.將吸附柱CB3放回收集管中,12000rpm(13,400g)離心2min,倒掉廢液。將吸附柱CB3置于室溫放置數(shù)分鐘,以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液; 10.將吸附柱CB3轉(zhuǎn)入一個干凈的離心管中,向吸附膜的中間部位懸空滴加50-200μL洗脫緩沖液TE,室溫放置2-5min,12000rpm(13400g)離心2min,將溶液收集到離心管中; |
生長條件 | 37℃;5%CO2+95%空氣; |
生長特性 | 貼壁生長 |
存儲條件 | -80℃ |
類型 | 肺鱗狀細胞癌 |
安全等級 | 1 |
形態(tài) | 上皮細胞樣,短梭形,多角形,邊緣不規(guī)則,單層貼壁生長,背景干凈 |
共享方式 | 公益性共享 |
證書下載 | 說明書文件 支原體檢測報告 |
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