北方偉業(yè)計量集團有限公司
| 培養(yǎng)基 | 85%DMEM-H+15%FBS |
| 傳代方法 | 復蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速沒入37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以1min內(nèi)全部溶解為宜；②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi)，1000-1200rpm離心5min，棄去上清液，用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細胞。③將細胞懸液加入到含有5-6mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代：①將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細胞層某處，肉眼可見細胞層脫落，即消化完成，否則繼續(xù)消化），直接吸掉胰酶，加入5-6mL完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。；④注意培養(yǎng)基pH值變化和細胞密度，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%-90%時，重復傳代操作或者凍存。 |
| 生長條件 | 37℃；5%CO2+95%空氣； |
| 生長特性 | 貼壁生長 |
| 存儲條件 | 液氮 |
| 類型 | 貼壁生長 |
| 安全等級 | 1 |
| 形態(tài) | 上皮細胞樣，多角形，不規(guī)則形，邊緣不規(guī)則，單層貼壁生長，背景干凈，有空泡 |
| 應用領(lǐng)域 | 人高轉(zhuǎn)移肝癌細胞，HCCLM3，這株細胞成瘤率高。 復旦大學中山醫(yī)院肝癌研究所在研究MHCC97時發(fā)現(xiàn)其是異質(zhì)性很強的細胞群。部分細胞有很強的致瘤性和轉(zhuǎn)移力，而部分則較弱。 因此分離建立了高低轉(zhuǎn)移性不同的肝癌細胞株MHCC97-H和MHCC97-L。據(jù)報道MHCC97-H存在較高的干細胞樣的側(cè)群細胞（sp）。肝癌SP細胞具有極高的致瘤性，并可能和肝癌轉(zhuǎn)移潛能相關(guān)。再用人肝癌細胞株MHCC97-H接種裸鼠，進行3次肺轉(zhuǎn)移篩選，取肺轉(zhuǎn)移瘤建成皮下接種后高度自發(fā)性肺轉(zhuǎn)移的肝癌細胞系MHCC97-LM3，即HCCLM3 |
| 共享方式 | 公益性共享 |
| 證書下載 | 說明書文件 支原體檢測報告 |
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