北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
培養(yǎng)基 | 3T3-Swiss albino專用培養(yǎng)基:88%DMEM-H+10%CS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉 |
傳代方法 | 復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速?zèng)]入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以1min內(nèi)全部溶解為宜;②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm離心5min,棄去上清液,用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入1-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,肉眼可見細(xì)胞層脫落,即消化完成,否則繼續(xù)消化),直接吸掉胰酶,加入5-6mL完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。③將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。;④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí),重復(fù)傳代操作或者凍存。 |
生長(zhǎng)條件 | 培養(yǎng)溫度37℃;氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣; |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
存儲(chǔ)條件 | 液氮 |
安全等級(jí) | 1 |
形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣,短梭形,邊緣不規(guī)則,單層貼壁生長(zhǎng) |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 支原體陰性‖動(dòng)物種別│小鼠‖描述│3T3 細(xì)胞株1962年從分解的瑞士小鼠胚胎中建立。 這株細(xì)胞是接觸抑制的。 一個(gè)長(zhǎng)滿的單層產(chǎn)量是40000細(xì)胞/平方厘米。測(cè)試發(fā)現(xiàn)肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。 細(xì)胞應(yīng)長(zhǎng)在塑料瓶中,在一些玻璃表面上可能長(zhǎng)不好。 飽和密度可以達(dá)到約50000細(xì)胞/平方厘米。STR鑒定結(jié)果:①該株細(xì)胞DNA進(jìn)行小鼠細(xì)胞STR分型結(jié)果顯示,擴(kuò)增后圖譜清晰,分型結(jié)果良好:1-1:10,15;1-2:13;2-1:9;3-2:14;4-2:19.3;5-5:13,15;6-4:15.2;6-7:12,15;7-1:25.2,29;8-1:15,16;11-2:15;12-1:19;13-1:15.1;15-3:20.3;17-2:12,15;18-3:17,21;19-2:12;X-1:26。②該株細(xì)胞確為小鼠細(xì)胞,沒(méi)有人源細(xì)胞污染。 |
共享方式 | 公益性共享 |
證書下載 | 說(shuō)明書文件 支原體檢測(cè)報(bào)告 |
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