（3）主要儀器

原子吸收分光光度計(jì)。

（4）試劑

①Ca標(biāo)準(zhǔn)溶液[(p(Ca)=1000mg·L-1)〕:稱取2.497gCaCO3(分析純，在110oC烘4h)溶于少量鹽酸溶液〔c(HCl)=1mol·L-1〕中，煮沸趕去CO2，用水洗入1000mL容量瓶中后定容?；蛑苯淤徺ICa標(biāo)準(zhǔn)液。

②)Mg標(biāo)準(zhǔn)液[ (p(Mg)=1000mg·L-1)]:1.0000g金屬鎂(分析純)溶于少量鹽酸溶液[c(HCl)=6 mol·L-1〕中用水洗入1000 mL容量瓶中后定容?；蛑苯淤徺IMg標(biāo)準(zhǔn)液。

③鑭溶液[(La)=50g·L-1]:稱13.40g LaCL3·7H2Og溶于100mL水中。

（5）操作步驟

吸取27.3.1.1或27.3.1.2的待測液2.00mL～5.00mL(含Ca 0.1 mg～0.5mg, Mg 0.01 mg～0.05mg)于50mL容量瓶中，加入鑭溶液[試劑(3)]1mL以控制硅、鋁或磷酸鹽的干擾，用水定容后即可用原子吸收分光光度計(jì)測定Ca和Mg。在相同儀器和溶液組成及酸度條件下，測定Ca和Mg標(biāo)準(zhǔn)溶液并繪制工作曲線，從而查出待測液中Ca和Mg的濃度(有些型號(hào)儀器測定Ca和Mg標(biāo)準(zhǔn)溶液后什算機(jī)自動(dòng)繪圖，測定待側(cè)液時(shí)計(jì)算機(jī)直接讀出或打印出待測液中Ca和Mg的濃度)。再根據(jù)分取倍數(shù)和稱樣量計(jì)算植物樣品中Ca和Mg的含量。

標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的況制:首先把1000mg·L-1 Ca標(biāo)準(zhǔn)液稀釋10倍，把1000mg·L-1Mg標(biāo)準(zhǔn)液稀釋100倍，然后吸取100mg·L-1Ca標(biāo)準(zhǔn)液0mL、1mL、2mL、3mL、4mL、5mL和10mg·L-1 Mg標(biāo)準(zhǔn)液0mL, 1mL,2 mL,3mL, 4mL, 5mL，將上述相同體積的Ca和Mg標(biāo)準(zhǔn)溶液置于同一個(gè)50mL容量瓶中，配成Ca-Mg混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液,加HCI溶液，使最后混合標(biāo)準(zhǔn)溶液組成及酸度與待測液相同，再加鑰溶液[試劑(3)]1 ml.，用水定容，即得到0mg·L-1、 2mg·L-1、4mg·L-1、6mg·L-1、8mg·L-1、10Mg·L-1 Ca和0mg·L-10.2 mg·L-1、0.4mg·L-1、0.6mg·L-1、0.8mg·L-1、1.0mg·L-1、Mg混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。也可根據(jù)待測液濃度在Ca和Mg的檢測限范圍內(nèi)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線做適當(dāng)調(diào)整。

（6）結(jié)果計(jì)算

式中: ω(Ca)或ω(Mg)——烘干植物樣品中全鈣(鎂)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；

P——原子吸收光潛議讀出的待測液中鈣(鎂)的質(zhì)量濃度，mg·L-1；

ts——分取倍數(shù)。

V——測定時(shí)待測液體積,mL；

m——烘干樣品質(zhì)量，g。

4、EDTA絡(luò)合滴定法

（1）方法原理

在pH＞12的溶液中，Mg2+即沉淀為Mg(OH)2，故可用EDTA標(biāo)準(zhǔn)液直接滴定Ca2+,以酸性鉻藍(lán)K和萘酚綠B混合指示劑(簡稱K-B指示劑)或鈣紅為指示劑，終點(diǎn)由葡萄酒紅色突變?yōu)榧兯{(lán)色。由EDTA標(biāo)準(zhǔn)液計(jì)算Ca2+的量。

在pH10的溶液中，可用EDTA滴定Ca2++ Mg2+合量，以K-B指示劑或鉻黑T為指示劑，終點(diǎn)也是由葡萄酒紅色變?yōu)樗{(lán)色。由Ca2++Mg 2+合量中減去Ca2+量，即為Mg2+量。以上為EDTA直接滴定法。對(duì)于含碗較高的植物樣品(如種子)，則須采用EDTA返滴定法，即加入過量的EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后再用Ca標(biāo)準(zhǔn)溶液返滴定過剩的EDTA。以免在堿性溶液中生成磷酸鈣而造成的誤差。

（2）主要儀器

150mL三角瓶；滴定管等。

（3）試劑

①EDTA標(biāo)準(zhǔn)液[c(C10H14O8N2Na2·H2O)=0.01mol·L-1]。

②鈣紅指示劑:0.5g鈣紅指示劑[2-羥基-1-(2-羥基-4磺酸-1-萘偶氮基)-3-蔡甲酸，C21H14O7N2S〕與50g NaCl研細(xì)混勻，貯于棕色瓶中。

③NaOH溶液[c(NaOH)=2 mol·L-1]:8.0g NaOH(分析純)溶于100mL無CO2水中。

④K-B指示劑:0.5g酸性鉻藍(lán)K和1g蔡酚綠B，與100g105℃烘過的NaCl(分析純)一同研細(xì)磨勻，貯于棕色瓶中。

⑤鉻黑T指示劑:0.5g鉻黑T與100g烘干的NaCl(分析純)共研至極細(xì)，貯于棕色瓶中。

⑥稀HCl[c(HCI)=1.2 mol·L-1],100mL濃HCl(分析純，P=1.19g·mL-1)用水稀釋至1L。

⑦氛緩沖溶液(pH=10):67.5g NH4Cl(分析純)溶于無CO2水中，加入濃氨水(分析純，P=O.9g·mL-1，含NH3 25%)570mL，用水稀釋至1L,貯于塑料瓶中，并注意防止吸收空氣中的CO2 。

也可用下列無臭而又穩(wěn)定的氮緩沖溶液:55mL濃HC1與400mL水混合后，邊攪邊加入310 mL2-氮基乙醇NH2CH2CH2OH，用水稀釋至1L。

⑧Ca標(biāo)準(zhǔn)液[c(Ca)=0.01mol·L-1]:準(zhǔn)確稱取在105℃下烘4小時(shí)～6小時(shí)的Ca-CO3(分析純)0.5004g。溶于25mL鹽酸溶液[c(HCI)=0.5mol·L-1]中煮沸除去CO2。用無CO2蒸餾水洗入500mL容量瓶并稀釋到刻度。

⑨三乙醇胺溶液[C6H15NO3(1:5)]:三乙醇胺與蒸餾水按1:5體積比混合。

(4)操作步驟

(1)EDTA直接滴定法(適用于一般莖葉樣品)

Ca的測定:吸取27.3.1.1或27.3.1.2待測液10.00mL(含Calmg～5mg)于150mL三角瓶中，用水稀釋至約50mL，加入1:5三乙醇胺溶液5mL，搖勻后放置2 min～3min，然后加入氫氧化鈉溶液[試劑(3)]4mL，搖勻，放置1min～2min，加入鈣紅或K-B指示劑0.1g，用0.01mol·L-1EDTA標(biāo)準(zhǔn)液滴定至紫紅色突變?yōu)榧兯{(lán)色為終點(diǎn)，記錄所耗EDTA液的mL數(shù)為V2。

參考資料：土壤農(nóng)業(yè)化學(xué)分析方法