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農(nóng)獸殘檢測方法—酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)-ELISA

基本原理：

使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。

在測定時，把受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。

用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。 

加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定量分析。

適用范圍：

ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。該法適于測定細(xì)胞培養(yǎng)上清、血清、血漿及組織液中的樣本，干擾小，可以測到每毫升納克水平的細(xì)胞因子（或受體）的水平。

三種必要試劑：

1. 固相的抗原或抗體。

2. 酶標(biāo)記的抗原或抗體。

3. 酶作用的底物。

紅外吸收光譜-IR

基本原理：

當(dāng)用一束具有連續(xù)波長的紅外光照射物質(zhì)時，該物質(zhì)的分子就要吸收一定波長的紅外光能量，并將其轉(zhuǎn)變?yōu)榉肿拥恼駝幽芎娃D(zhuǎn)動能，從而引起分子振動-轉(zhuǎn)動能級躍遷。通過儀器記錄下不同波長的透光率（或吸光度）的變化曲線，即是該物質(zhì)的紅外光譜。紅外吸收光譜也是一種分子吸收光譜。

紅外吸收光譜一般用T~曲線或T~波數(shù)曲線表示?？v坐標(biāo)為百分透射比T%，因而吸收峰向下，向上則為谷；橫坐標(biāo)是波長（單位為µm ），或波數(shù)（單位為cm-1）。10000/波數(shù)=波長（um）

紅外光譜的特點：

優(yōu)點：1.應(yīng)用廣，提供信息多且具有特征性。

2.不受物體的相態(tài)限制  

3.樣品用量少，分析速度快，操作簡便

局限性：1.不能產(chǎn)生紅外吸收的物質(zhì)無法測定

2.旋光異構(gòu)體以及不同分子量的同一高聚物無法鑒別

3.譜圖上不是所有的峰都能作出理論解釋