北方偉業(yè)計量集團有限公司
有機蔬菜生產(chǎn)中生物防治植物線蟲病的主要生物類型,淡紫擬青霉并提出了提高生物防治效果的途徑。植物線蟲病在我國局部發(fā)生、危害嚴重,幾乎每種作物上都有1~2種線蟲病,有的發(fā)生面積不斷擴大,危害越來越重,已成為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上亟待解決的問題之一。淡紫擬青霉在植物根系周圍施用淡紫擬青霉菌劑不僅能明顯抑制線蟲侵染,而且能促進植物根系及植株營養(yǎng)器官的生長,
常規(guī)的化學防治的農(nóng)藥的毒性較大,危害綠色食品的生產(chǎn),所以應(yīng)尋找新的技術(shù)。淡紫擬青霉生物農(nóng)藥生物防治植物病原線蟲是研究的熱點,已發(fā)現(xiàn)可以防治線蟲病的生物有捕食線蟲的真菌、線蟲、渦蟲、線蚓、昆蟲、螨類等;寄生線蟲的病毒、原生動物、細菌等;還可用植物的提取液,其防治效果也較好。
生物防治是病害防治中最具有應(yīng)用前景的防治方法,符合環(huán)保和健康理念。但國內(nèi)用于防治根結(jié)線蟲病的生防產(chǎn)品非常少,大多數(shù)對根結(jié)線蟲有作用的生防制劑都還處于研發(fā)階段。在登記的生防產(chǎn)品僅有“線蟲必克”和阿維菌素以及最近登記的淡紫擬青霉。在蔬菜根結(jié)線蟲防治上用的較多的有阿維菌素??捎?.5%阿維菌素顆粒劑15-17.5g/畝進行溝施或穴施。但作為生物農(nóng)藥阿維菌素存在幾乎所有生物農(nóng)藥不可避免的弱點,即田間使用效果不太穩(wěn)定。
根結(jié)線蟲病主要為害蔬菜根部,側(cè)根和須根最易受害。受害根部產(chǎn)生大小不等的瘤狀物或根結(jié),根結(jié)初為白色,柔軟,后變?yōu)闇\黃褐色或深褐色,表面粗糙,有時裂開。剖開根結(jié),可看到白色珍珠狀小顆粒,是根結(jié)線蟲的雌成蟲。蔬菜受根結(jié)線蟲侵染后生長發(fā)育緩慢,葉片小而黃。發(fā)病重時,植株矮小,不結(jié)實或結(jié)實不良,遇高溫干旱天氣時,植株易萎蔫甚至枯死。
淡紫擬青霉可以寄生多種植物線蟲,包括根結(jié)線蟲、孢囊線蟲等重要經(jīng)濟線蟲的卵和幼蟲,在其代謝過程中,可以產(chǎn)生具有殺線蟲活性的物質(zhì),抑制線蟲的孵化或直接使卵失去活性。弄清楚淡紫擬青霉如何寄生線蟲,對于正確使用該生防菌,提高防效有很大幫助。多年來,國內(nèi)外學者做了大量研究。高學彪和汪軍分別采用雙溫測定法,室內(nèi)測定淡紫擬青霉對南方根結(jié)線蟲和香蕉根結(jié)線蟲卵的相對寄生率為92.6%和94.3%。汪來發(fā)研究了來自不同地域的淡紫擬青霉的13個菌株,分別用其孢子液處理南方根結(jié)線蟲卵囊、孢子液處理分散卵粒、菌絲處理分散卵粒,結(jié)果表明了不同菌株對南方根結(jié)線蟲的寄生能力有很大差異,且用孢子液處理卵囊的寄生率顯著高于其他兩種處理,寄生能力最強的菌株其寄生率可達74.62%。張雯等研究了淡紫擬青霉對根結(jié)線蟲的侵染作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn),菌絲侵入線蟲卵消化了卵內(nèi)容物而卵殼完整,推測幾丁質(zhì)酶在侵染卵過程中起穿透卵殼幾丁質(zhì)層的作用,而不以幾丁質(zhì)為營養(yǎng)。
劉國坤對淡紫擬青霉FZ-0289菌株體外寄生南方根結(jié)線蟲卵進行了研究,結(jié)果表明接種7d后,對胚胎發(fā)育期卵的寄生率為98.2%,對含卵的寄生率為88.6%,卵囊接種14d后,卵囊內(nèi)卵寄生率為94.5%。淡紫擬青霉PL050705菌株離體寄生柑橘半穿刺線蟲,對胚胎期卵的寄生率為83.33%,對卵內(nèi)有幼蟲卵的寄生率為43.75%。HollandRJ等研究了淡紫擬青霉體外寄生爪哇根結(jié)線蟲卵、3齡、4齡幼蟲和雌蟲成蟲,結(jié)果表明:淡紫擬青霉侵染卵過程中,菌絲首先在卵表面膨大然后形成侵染釘,然后侵入卵,最后菌絲從卵里面繼續(xù)生長出來或形成孢子,淡紫擬青霉也容易侵染3齡、4齡幼蟲和雌蟲成蟲。KhanA研究了淡紫擬青霉侵染爪哇根結(jié)線蟲、禾谷孢囊線蟲、香蕉穿孔線蟲這三種植物線蟲,淡紫擬青霉通過菌絲直接穿透爪哇根結(jié)線蟲體壁,從而侵染卵、幼蟲和成蟲;胚胎時期卵與含有幼蟲的卵相比,較易侵染。淡紫擬青霉也可以侵染體內(nèi)含有卵的早熟孢囊和香蕉穿孔線蟲,但無法侵染成熟的褐色孢囊。
專家學者門通過生物化學和分子生物學手段去闡明淡紫擬青霉對植物線蟲的寄生機制,一般認為淡紫擬青霉對植物線蟲的寄生機制是菌絲機械壓力和菌絲分泌的多種酶共同作用的結(jié)果。淡紫擬青霉與線蟲的孢囊或卵接觸后,菌絲頂端變粗,形成侵染釘,隨后侵染釘分泌胞外物質(zhì)(ECM)或粘性物質(zhì),在侵染釘?shù)臋C械壓力和分泌物的共同作用下,侵染釘侵入線蟲卵殼。胞外物質(zhì)(ECM)含有蛋白質(zhì)酶P23,其蛋白水解活性引起卵殼的降解。根結(jié)線蟲和孢囊線蟲卵殼由卵黃層、幾丁質(zhì)層和脂質(zhì)層組成,其主要成份是幾丁質(zhì)和蛋白質(zhì),因此,幾丁質(zhì)酶和蛋白質(zhì)酶在侵染過程中起到重要作用。
普遍認為淡紫擬青霉專門寄生不動狀態(tài)的線蟲,尤其卵,但也有報道淡紫擬青霉能夠寄生活動狀態(tài)的線蟲(幼蟲和成蟲),尚缺少其寄生活動狀態(tài)的線蟲機制的資料。幾丁質(zhì)酶不僅能能降解線蟲卵殼,還能促進線蟲的孵化,同時該酶對幼蟲有一定的致死作用。PeterJMB研究了淡紫擬青霉與北方根結(jié)線蟲卵互作,表明淡紫擬青霉在侵染卵的過程中有裂解酶的參與;且胚胎期的卵極易受蛋白酶的破壞,而含幼蟲的卵和已孵化的幼蟲則對蛋白酶表現(xiàn)出一定的抵抗能力。KhanA用透視電鏡研究了蛋白酶和幾丁質(zhì)酶對爪哇根結(jié)線蟲孵化的影響,結(jié)果表明,蛋白酶或幾丁質(zhì)酶顯著改變卵殼結(jié)構(gòu),或使幾丁質(zhì)層變薄、或出現(xiàn)氣泡、或出現(xiàn)卵層分離,卵發(fā)生了形態(tài)學和生理學上的變化,失去完整性,無法進一步發(fā)育或孵化。
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