5、最陡爬坡實驗

選擇合適的步長，對X₂、X₂、X₆，3個顯著因素進行最陡爬坡實驗，結(jié)果如表3所示，隨X₂，X₂，X₆含量的增加，發(fā)酵液中色素吸光度值(Y)先升高后降低，在第3組達到最高，因此以第3組濃度作為響應面實驗的中心點。

6、響應面實驗設(shè)計及結(jié)果

根據(jù)最陡爬坡實驗結(jié)果，對X₂，X₂，X₆進行響應面設(shè)計，各因素水平如表4所示，響應面試驗設(shè)計及結(jié)果如表5所示。對實驗結(jié)果進行數(shù)學方程擬合，得到色素吸光值(Y)與3個顯著性因素的二次回歸模型：

吸光值=1.0037+0.0204X₂+0.0489X₄+0.0442X₆-0.1100X₂X₂-0.0925X₄X₄-0.1522X₆X₆-0.0132X₂X₄+0.0595X₂X₆+0.0640X₄X₆

有回歸模型的方差分析(表6)可知：F=8.08、P=0.017(P＜0.05)表示回歸模型顯著，決定系數(shù)R²=0.9357(R²＞0.85)，失擬項P=0.052(P＞0.05)表示失擬項不顯著、回歸模型擬合度良好。由表7可知X₂X₂，X₄X₄的P值小于0.05，表明NaN0₃、MgS0₄·7H₂0的二次項對模型具有顯著影響，X₆X₆的P值小于0.01，表明CS的二次項對模型具有極顯著影響，而一次項和交互項的顯著性較差，也驗證了各因素與響應值之間不是線性關(guān)系。

利用Minitabl7得到該模型X₂、X₄、X₆的極值分別為0.1313、0.3333、0.2323，結(jié)合最陡爬坡實驗設(shè)計的原理得到X₂、X₄、X₆的真實值分別為0.6803、0.0366、14.4646，實際操作中可取X₂=0.68、X₄=0.037、X₆=14.5，故優(yōu)化后的發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為：NaNO₃ 0.68g/L，K₂HPO₄ 0.48g/L，MgSO₄·7H₂O 0.037g/L，CaCl₂·2H₂O 0.036g/L，葡萄糖18g/L，CS14.5mL/L，TM1mL/L。經(jīng)過重復性實驗得到優(yōu)化后培養(yǎng)基中色素吸光度值為1.004，是優(yōu)化前0.612的1.64倍。

三、結(jié)論

（1）真菌DT06產(chǎn)生的黃色色素是一種新色素，為多羥基化合物。

（2）DT06色素有良好的抗氧化性和穩(wěn)定性，具有潛在應用價值。

（3）培養(yǎng)基優(yōu)化后DT06色素的產(chǎn)量是優(yōu)化前的1.64倍。

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