3結(jié)果分析

3.1制備所得紐莫康定B₀凍干粉質(zhì)量分析

在優(yōu)化后的150mm制備條件(采用正相硅膠，V(二氯甲烷(工業(yè)))∶V(甲醇)∶V(水)=42∶9∶1，上樣量為11.4g粗品，洗脫流量為480mL/min，檢測波長分別為276，210nm)下，上樣量共980g，得到4批次紐莫康定B₀凍干粉質(zhì)量共343.7g，其質(zhì)量情況如表5所示。

由表5知：各批次凍干粉B₀質(zhì)量分?jǐn)?shù)均大于95%(以凍干粉1為例，其HPLC檢測如圖2所示，紐莫康定B₀的色譜純度為98.58%，紐莫康定C₀的色譜純度為0.04%)，可用于下游合成。另外，各凍干粉C₀雜質(zhì)均降低至0.05%以下。周永正等以表面修飾了極性基團(tuán)的硅膠親水材料進(jìn)行層析，可以將關(guān)鍵雜質(zhì)C₀降至小于0.1%。相比，筆者開發(fā)的方法更能夠?qū)~莫康定B₀的異構(gòu)體C₀進(jìn)行有效去除，紐莫康定B₀是合成醋酸卡泊芬凈的起始原料，因此在產(chǎn)品質(zhì)量上，為下游合成提供了有效保證。

3.2制備液穩(wěn)定性分析

王欣榮等發(fā)現(xiàn)分離過程中紐莫康定穩(wěn)定性差的問題。在前期小試研究中，亦發(fā)現(xiàn)紐莫康定B₀制備液常溫放置不穩(wěn)定，會(huì)有RRT1.36雜質(zhì)峰出現(xiàn)。實(shí)驗(yàn)以紐莫康定B₀制備收集液為研究對(duì)象，在4℃冷庫(避光)的保存條件下對(duì)穩(wěn)定性進(jìn)行了簡單摸索。液相檢測數(shù)據(jù)如表6所示。由表6可知：4℃避光條件下，B₀制備液放置7d時(shí)，B0的HPLC色譜純度降低了0.69%，RRT0.96峰和RRT1.14峰的HPLC色譜純度基本不變；RRT1.36峰在放置9d時(shí)檢測出來；13d時(shí)，RRT0.96峰的HPLC色譜純度降低很小，紐莫康定B₀的HPLC色譜純度減小了0.71%，RRT1.14峰的HPLC色譜純度增加了0.34%，RRT1.36峰的HPLC色譜純度增加至0.27%。因此，紐莫康定B0制備液在4℃避光的條件下7d內(nèi)相對(duì)穩(wěn)定。在中試生產(chǎn)中，紐莫康定B₀制備液需及時(shí)放入4℃冷庫中保存，需要7d內(nèi)處理完畢。在實(shí)際中試研究中，有4℃避光冷庫作為輔助可以保證儲(chǔ)藏條件，制備液放置時(shí)間為影響其穩(wěn)定性的主要因素，因此實(shí)驗(yàn)中沒有考察光照、溫度對(duì)制備液穩(wěn)定性的影響。

3.3總收率分析

高壓制備紐莫康定B₀的中試研究分4個(gè)亞批進(jìn)行，總消耗紐莫康定B₀的粗品質(zhì)量980g。為了對(duì)放大規(guī)模的商業(yè)化生產(chǎn)提供數(shù)據(jù)支持和借鑒，需要對(duì)總收率進(jìn)行計(jì)算，實(shí)驗(yàn)總收率計(jì)算式為

式中：E為凍干粉i的質(zhì)量；F為凍干粉的B₀質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

經(jīng)過計(jì)算，總收率為41.32%。影響總收率的因素主要有：填料、制備方法和卡泊芬凈合成對(duì)紐莫康定B₀的粗品質(zhì)量需求等。為了提高總收率，可以和生產(chǎn)填料的廠商尋求合作，開發(fā)新型改良正相硅膠，進(jìn)而繼續(xù)優(yōu)化適合其使用的色譜制備方法，優(yōu)化卡泊芬凈合成后的提純工藝。亦或，統(tǒng)籌從發(fā)酵液至卡泊芬凈整體的提取工藝，達(dá)到一個(gè)合理的平衡點(diǎn)，以降低其對(duì)紐莫康定B₀的粗品質(zhì)量要求，進(jìn)而可以提高紐莫康定B0高壓制備的收率。

另外，為了提高生產(chǎn)的總收率和降低成本，也可以將高壓制備過程中產(chǎn)生的HPLC色譜純度低于95%的B₀制備液進(jìn)行回收利用。具體方法：將低濃度制備液經(jīng)過收集、濃縮和干燥后，得到回收凍干粉(HPLC檢測如圖3所示，紐莫康定B₀的色譜純度為84.30%，紐莫康定C₀的色譜純度為0.65%)，再次進(jìn)行制備回收套用。

4結(jié)論

以二氯甲烷、甲醇和水體系制備紐莫康定B₀，國內(nèi)外未見具體報(bào)道。筆者以單因素實(shí)驗(yàn)的方法確定了150mm高壓制備紐莫康定B₀的條件：采用正相硅膠，V(二氯甲烷(工業(yè)))∶V(甲醇)∶V(水)=42∶9∶1，上樣量為11.4g粗品，洗脫流量為480mL/min，檢測波長分別為276，210nm。相比氯仿、甲醇和水體系，該制備工藝毒性小，更綠色環(huán)保。以優(yōu)化后條件，可以得到質(zhì)量分?jǐn)?shù)95%以上的B₀干粉，能有效將B₀異構(gòu)體C₀降至0.05%以下，為下游合成卡泊芬凈提供了更好的保證。通過對(duì)紐莫康定B₀制備液穩(wěn)定性研究，制備液需及時(shí)放入4℃冷庫中保存，需要7d內(nèi)處理完畢，為進(jìn)一步放大生產(chǎn)提供了數(shù)據(jù)支持。制備工藝生產(chǎn)周期短、成本低，且純度高。

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