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二、結(jié)果與分析
1、板栗殼原花青素穩(wěn)定性影響因素研究
(1)光照對板栗殼原花青素穩(wěn)定性的影響
由圖1可知,板栗殼原花青素溶液在光照條件下,原花青素的保存率對比另外兩種情況下降速度更快,同時光照條件下溶液顏色易由棕紅色變成淡紅色,而在室溫避光和低溫避光條件下,顏色沒有明顯變化;這與高凝軒等的實驗結(jié)果一致,可能原花青素的結(jié)構(gòu)在光照條件下被破壞,故光照對原花青素的穩(wěn)定性有影響。
(2)溫度對板栗殼原花青素穩(wěn)定性的影響
由圖2可知,溫度在40~60℃范圍內(nèi),原花青素的保存率基本不變,即在該溫度范圍內(nèi),原花青素相對比較穩(wěn)定,降解不大;當溫度高于60℃時,板栗殼原花青素保存率不斷下降,高溫可能導(dǎo)致原花青素發(fā)生氧化聚合,則板栗殼原花青素在提取、濃縮、干燥及保存過程中,應(yīng)使溫度低于60℃。
(3)pH對板栗殼原花青素穩(wěn)定性的影響
由圖3可知,當pH在1~7范圍內(nèi),原花青素保存率變化很小,則此pH值范圍適于原花青素的保存;當pH>7時,隨著pH增大,原花青素保存率不斷下降,且當pH>8時,原花青素溶液顏色發(fā)生變化;根據(jù)報道,原花青素在堿性條件下其結(jié)構(gòu)易發(fā)生降解和差向異構(gòu)化,導(dǎo)致含量下降。即堿性條件下容易造成板栗殼原花青素結(jié)構(gòu)的破壞,使穩(wěn)定性下降。
(4)金屬離子對板栗殼中原花青素穩(wěn)定性的影響
原花青素對金屬離子較敏感,多價金屬離子可以與原花青素的鄰二酚羥基發(fā)生絡(luò)合反應(yīng),形成五元環(huán)螯合物。板栗殼原花青素在K+、Na+、Al3+、Mg2+條件下沒有發(fā)生變化;在Cr3+、Zn2+、Sn2+、Ca2+條件下產(chǎn)生少量絮狀物,而在Fe3+、Fe2+、Ba2+存在的條件下產(chǎn)生大量黑色絮狀物,這是由于Fe3+、Fe2+、Ba2+與原花青素的鄰位二羥基形成了不溶性的絡(luò)合物。故在原花青素樣品保存過程中,應(yīng)注意避免與Fe3+、Fe2+、Ba2+接觸。
2、原花青素結(jié)構(gòu)分析
(1)原花青素種類鑒定
板栗殼粗提物組分復(fù)雜,對比文獻報道的原花青素類質(zhì)荷比,選擇合適的分子離子峰進行碰撞誘導(dǎo)解離,根據(jù)二級質(zhì)譜裂解獲得的碎片離子及文獻進一步對比,鑒定出粗提物中原花青素種類有沒食子酸、兒茶素、沒食子兒茶素、B型原花青素二聚體,HPLC-MS分析結(jié)果見表1。
(2)沒食子酸二級質(zhì)譜裂解規(guī)律分析
沒食子酸的苯環(huán)上含有3個羥基和1個羧基,在ESI-的質(zhì)譜條件下失去1個H離子生成[M-H]-,以m/z169.2為母離子進行碰撞誘導(dǎo)解離,其主要的裂解碎片離子為m/z124.7,與文獻的報道一致。分子離子裂解規(guī)律見表2,m/z124.7為失去一分子羧基所得。
(3)兒茶素二級質(zhì)譜裂解規(guī)律分析
兒茶素主要的二級碎片離子有m/z124.7,178.7,204.7,244.7,與劉國強等報道的結(jié)果吻合。分子離子峰裂解規(guī)律見表2,碎片峰1的m/z24.7為A環(huán)的1,4開環(huán)裂解得到;m/z178.7為[M-H]-失去一分子C6H6O2產(chǎn)生的碎片離子峰;m/z204.7為[M-H]-失去兩分子C2H2O產(chǎn)生;m/z244.7為[M-H]-失去一分子CO2所得。
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