我國是大米消費(fèi)大國，甲基嘧啶磷是殺蟲、殺螨劑，廣泛用于谷物保護(hù)劑，對害蟲具有觸殺作用，殺蟲速度快，持效期長，GB2763-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》和原國家食藥總局發(fā)布的《2018版國家食品安全監(jiān)督抽檢實(shí)施細(xì)則》都規(guī)定了大米中甲基嘧啶磷殘留量用GB/T5009.145-2003《植物性食品中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多種殘留的測定》標(biāo)準(zhǔn)方法檢測，方法已有近20年了，隨著科技的不斷進(jìn)步，檢測方法沒有得到相應(yīng)的研究和發(fā)展，GB/T5009.145—2003標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定使用NPD檢測器，NPD檢測器重現(xiàn)差比較差，受氫氣流量和銣珠電壓影響很大，銣珠又是耗材，隨著時(shí)間的推移，銣珠的靈敏度也跟著下降，安捷倫的銣珠正常壽命在1年左右，標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的前期也比較繁瑣，加標(biāo)回收率也比較低；大多數(shù)的檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)不再使用NPD檢測器了，筆者在實(shí)驗(yàn)中利用安捷倫FPD檢測器，不僅檢測結(jié)果重現(xiàn)性好，而且樣品前期處理簡單，不會影響儀器的使用壽命，樣品直接用丙酮溶解，過濾，濃縮（ 在50℃水浴鍋上，甲基嘧啶磷沸點(diǎn)約330℃），用氣相專用小柱凈化，干擾物質(zhì)少，是定量檢測大米中甲基嘧啶磷殘留量的理想方法。

一、材料與方法

1、儀器與試劑
兩臺安捷倫7890B氣相色譜儀（ 1臺配有FPD檢測器、磷濾光片，另1臺NPD檢測器）；7693液體自動進(jìn)樣器和150位進(jìn)樣盤。

丙酮（ 色譜純，甲基嘧啶磷標(biāo)樣濃度100μg/mL，不確定度3%）：北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司；上海安譜實(shí)驗(yàn)科技有限公司的有機(jī)相相針式濾器（ 尼龍），100只/罐，13mm，0.22μm。

2、色譜條件

（1）色譜條件一

色譜柱：DB-1701毛細(xì)管柱（ 30mx0.32mmx0.25μm）；檢測器300℃（NPD檢測器），進(jìn)樣口室度：240℃，柱溫箱：80℃保持lmin，10℃/min升溫至240℃保持10min；后運(yùn)行250℃載氣：高純氮；柱流速：0.8mL/min。進(jìn)樣模式：不分流進(jìn)樣。進(jìn)樣量：1μL。

（2）色譜條件二

色譜柱：DB-1701毛細(xì)管柱（ 30mx0.32mmx0.25μm）；檢測器260℃（FPD檢測器），進(jìn)樣口室度：220℃，柱溫箱：100℃保持0min，10℃/min升溫至220℃保持14min；后運(yùn)行250℃，載氣：高純氮；柱流速：0.8mL/min。進(jìn)樣模式：不分流進(jìn)樣。進(jìn)樣量：1μL。

3、標(biāo)準(zhǔn)曲線

（1）準(zhǔn)確移取標(biāo)準(zhǔn)溶液0.01、0.02、0.04、0.8、1mL于10mL的容量瓶中，以丙酮稀釋定容，配成標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為0.1、0.1、0.4、0.8、1μg/mL，現(xiàn)用現(xiàn)配，繪制甲基嘧啶磷標(biāo)準(zhǔn)曲線。

4、試樣制備及測定

（1）GB/T5009.145-2003標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的樣品提取方法是：稱取20g（精確至0.01g）樣品于三角瓶中，加入5g無水硫酸鈉和100mL丙酮，振蕩提取30min，過濾后取50mL濾液于分液漏斗中；凈化：向分液漏斗中加入50mL5%氯化鈉溶液，再以50mL、50mL、30mL二氯甲烷提取三次，合并二氯甲烷層經(jīng)無水硫酸鈉過濾后，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀40℃水浴上濃縮近干，定容至1mL，待測。標(biāo)準(zhǔn)方法前期處理比較繁瑣，需要大量的有機(jī)試劑，不僅浪費(fèi)，而且會污染環(huán)境，二氯甲烷溶液是一種具有一定的毒性，對人體有一定的危害，美國將其列入可疑致癌物，因而采用下列提取方法。

（2）準(zhǔn)確稱取混合混勻樣品20g（ 精確至0.01g）于250mL三角瓶中，加入100mL丙酮，振蕩提取30min，樣液過濾于蒸發(fā)皿中，在50℃水浴鍋上濃縮近干，用丙酮定容至lmL，用0.22μm氣相濾頭過濾于進(jìn)樣瓶中，待測。同時(shí)做空白試驗(yàn)，樣品的提取在通風(fēng)櫥中進(jìn)行。

在試驗(yàn)條件下，F(xiàn)PD檢測器樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖見圖1、2。

NPD檢測器中，0.1μg/mL甲基嘧啶磷標(biāo)準(zhǔn)溶液出峰太小，0.5μg/mL甲基嘧啶磷標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積才40左右，儀器靈敏度不如FPD。

NPD檢測器中，0.1μg/mL甲基嘧啶磷標(biāo)準(zhǔn)溶液出峰太小，基本忽略不計(jì)，0.5pug/mL甲基嘧啶磷標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積才40左右，儀器靈敏度不如FPD，在FPD檢測器中，0.1μg/mL甲基嘧啶磷在20g大米中檢測結(jié)果約為0.005mg/kg，在NPD檢測器中卻是未檢出。安捷倫公司的反饋，購買安捷倫氣相色譜檢測有機(jī)磷的，使用FPD檢測器的比NPD檢測器的要多的多，F(xiàn)PD檢測器具有更大的優(yōu)勢。

二、結(jié)果與討論

1、檢測器及柱箱程序升溫的選擇從上面可以得出：FPD相對于NPD，對有機(jī)磷檢驗(yàn)具有明顯的優(yōu)勢，不需要更換耗材（ 銣珠，普通的都一萬多元），靈敏度高，重現(xiàn)性高，對環(huán)境影響小。利用正交試驗(yàn)法對色譜柱、進(jìn)樣口、檢測器溫度進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì)，找出最佳溫度和程序升溫時(shí)間。即：FPD檢測器260℃，進(jìn)樣口室度：220℃，柱溫箱：100℃保持0min，10℃/min升溫至220℃保持14min；后運(yùn)行250℃，載氣：高純氮；柱流速：0.8mL/min。進(jìn)樣模式：不分流進(jìn)樣。進(jìn)樣量：1μL。

2、色譜柱的選擇

實(shí)驗(yàn)室常用的非極性、弱極性、中等極性、極性柱進(jìn)行試驗(yàn)。根據(jù)待測物的性質(zhì)，以及參考相關(guān)文獻(xiàn)，最終選擇DB-1701毛細(xì)管柱（ 30mx0.32mx0.25μm），分離效果最理想。樣品中檢測出甲基嘧啶磷物質(zhì)，還需用中等極性DB-1毛細(xì)管柱（ 30mx0.53mmx1.50ym）進(jìn)行確認(rèn)。

3、標(biāo)準(zhǔn)曲線、精密度和檢出限

按試驗(yàn)方法測定標(biāo)準(zhǔn)使用液系列，5～50μg/kg范圍內(nèi)呈線性，利用安捷倫7890B氣相色譜儀工作站中的校正表得出線性回歸方程為Y=306.57526X+1.21031，相關(guān)系數(shù)r=0.99937。

0.1μg/mL甲基嘧啶磷標(biāo)準(zhǔn)譜圖中，工作站得出的信號噪聲比為16.8，逐級稀釋0.1μg/mL甲基嘧啶磷標(biāo)準(zhǔn)濃度至0.02μg/mL時(shí)，工作站得出的信號噪聲比為3.4，即0.02ug/mL是甲基嘧啶磷的最低檢測濃度，此時(shí)計(jì)算在20g大米中進(jìn)樣量1μL時(shí)甲基嘧啶磷檢測限（ 3S/N）為0.02÷20=lμg/kg。取市場上檢測出甲基嘧啶磷的大米10份，準(zhǔn)確稱取混合混勻樣品20g（ 精確至0.01g）于250mL三角瓶中，加入100mL丙酮，振蕩提取30min，樣液過濾于蒸發(fā)皿中，在50℃水浴鍋上濃縮近干，用丙酮定容至lmL，用0.22μm氣相濾頭過濾于進(jìn)樣瓶中，待測。同時(shí)做空白試驗(yàn)，樣品的提取在通風(fēng)櫥中進(jìn)行。做精密度試驗(yàn)，測出甲基嘧啶磷的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為3.26%。

4、方法的回收率

準(zhǔn)確稱大米（ 2.3）20g共3份于250mL三角瓶中，迅速加入0.1、0.2、0.5mL甲基嘧啶磷標(biāo)樣（ 1μg/mL）。按以下兩種方法進(jìn)行分析：（1）GB/T5009.145-2003標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的樣品提取方法是：稱取20g（精確至0.01g）樣品于三角瓶中，加入5g無水硫酸鈉和100mL丙酮，振蕩提取30min，過濾后取50mL濾液于分液漏斗中；凈化：向分液漏斗中加入50mL5%氯化鈉溶液，再以50mL、50mL、30mL二氯甲烷提取三次，合并二氯甲烷層經(jīng)無水硫酸鈉過濾后，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀40℃水浴上濃縮近干，定容至1mL，待測。標(biāo)準(zhǔn)方法前期處理比較繁瑣，需要大量的有機(jī)試劑，不僅浪費(fèi)，而且會污染環(huán)境，二氯甲烷溶液是一種具有一定的毒性，對人體有一定的危害，美國將其列入可疑致癌物，因而采用下列提取方法。

（2）準(zhǔn)確稱取混合混勻樣品20g（ 精確至0.01g）于250mL三角瓶中，加入100mL丙酮，振蕩提取30min，樣液過濾于蒸發(fā)皿中，在50℃水浴鍋上濃縮近干，用丙酮定容至lmL，用0.22μm氣相濾頭過濾于進(jìn)樣瓶中，待測。同時(shí)做空白試驗(yàn)，樣品的提取在通風(fēng)櫥中進(jìn)行。平行測定3次，被測樣品加標(biāo)回收率在86.79%～93.5%，測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

三、結(jié)論

采用該方法對大米中甲基嘧啶磷殘留量進(jìn)行測定，方法采用外標(biāo)法，前處理簡單，有機(jī)試劑用的少，干擾組分少，環(huán)境污染小，分析時(shí)間短。通過對樣品的加標(biāo)回收和樣品中目標(biāo)物質(zhì)的反復(fù)多次驗(yàn)證，測試結(jié)果表明，該方法精密度和準(zhǔn)確度高，靈敏度好，觖決了NPD檢測器的缺點(diǎn)，非常適合批量大米中甲基嘧啶磷殘留量的快速定量檢測。

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