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3、正交試驗優(yōu)化提取工藝結(jié)果討論
由表2分析可知,A因素中各水平影響順序為A3>A2>A1,B因素中各水平影響順序為B3>B2>B1,C因素中各水平影響順序為C3>C2>C1,D因素中各水平影響順序為D2>D3>D1,E因素中各水平影響順序為E2>E3>E1。影響沙棘葉中總黃酮提取率因素的大小順序為:B>D>E>C>A,即微波功率>料液比>離子液體濃度>微波溫度>微波時間,微波功率對棘葉的總黃酮提取率影響最大。最佳提取工藝條件為A3B3C3D2E2,即微波時間6min,微波功率500W,微波溫度80℃,料液比1∶20(g·mL-1),溴化1-十二烷基-3-甲基咪唑濃度1.0mol·L-1。
4、驗證試驗
由于優(yōu)化的提取工藝正交試驗結(jié)果表中沒有,為了進一步驗證優(yōu)化方法的可靠性,按優(yōu)化工藝進行驗證試驗。準確稱取未洗陰干沙棘葉粉末1.0g,在最佳提取工藝:微波時間6min,微波功率500W,微波溫度80℃,料液比1∶20(g·mL-1),離子液體濃度1.0mol·L-1的條件下提取沙棘葉總黃酮,測得提取率為10.63%,該提取率高于表3.1中的每一項提取率。驗證結(jié)果表明,優(yōu)化后的提取工藝結(jié)果可靠。
5、不同前處理的沙棘葉對提取效果的影響
由圖8可知,沙棘葉前處理方式不同,總黃酮提取率略有差別??傸S酮提取率大小順序為:
G>A>F>B>D>C>E,即炒制(5月份)>水洗陰干(6月份)>自然干曬(5月份)>未洗陰干(6月份)>炒制(6月份)>發(fā)酵陰干(6月份)>蒸青制作(5月份)。其中,炒制(5月份)沙棘葉總黃酮提取率最高。
6、沙棘葉總黃酮抗氧化活性試驗結(jié)果討論
由圖9、10可以看出,VC與沙棘葉總黃酮對DPPH自由基的清除率與濃度成正比。VC對DPPH自由基清除率IC50=0.0019mg·mL-1。沙棘葉總黃酮的濃度對DPPH自由基的清除率IC50=0.0511mg·mL-1。雖然沙棘葉總黃酮對DPPH自由基的清除率小于VC,但也具有一定清除力。
三、結(jié)論
本試驗采用單因素分析結(jié)合正交試驗的方法,研究了影響沙棘葉總黃酮提取率的因素以及最佳提取工藝,并研究了最佳提取條件下提取的總黃酮對DPPH自由基的清除率。研究結(jié)果顯示,影響沙棘葉總黃酮提取率因素的大小順序為:微波功率>料液比>離子液體溴化1-十二烷基-3-甲基咪唑濃度>微波溫度>微波時間。其中微波功率對沙棘葉總黃酮的提取率影響最顯著。最佳提取工藝為:料液比1∶20(g+mL-1),微波功率500W,微波溫度80℃,微波時間6min,離子液體溴化1-十二烷基-3-甲基咪唑的濃度1.0mol·L-1在該提取條件下,沙棘葉總黃酮提取率平均值為10.63%。炒制沙棘葉(5月采摘)總黃酮提取率最高。由抗氧化活性研究試驗結(jié)果得知,該工藝下提取的沙棘葉總黃酮對DPPH自由基具有較好的清除能力。
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