溫飽走向小康，對生活品質(zhì)和環(huán)境有了更高的追求，對水質(zhì)環(huán)境，尤其是對作為飲用水水源的水質(zhì)環(huán)境和飲用水安全也越來越重視。世界衛(wèi)生組織指出，微生物污染對水質(zhì)有嚴(yán)重的影響，對其監(jiān)測控制是非常重要的，按《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》掌握的風(fēng)險(xiǎn)，微生物致病率比有機(jī)物致病率大很多，安全供水可以使人類壽命有很大的提高?？梢娢⑸餀z測在水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測的重要性，那么如何確保微生物檢測結(jié)果的準(zhǔn)確可靠呢？本文結(jié)合實(shí)際從水質(zhì)環(huán)境常檢的微生物指標(biāo)（總大腸菌群、耐熱大腸菌群、大腸埃希氏菌、菌落總數(shù)）檢測流程逐一分析質(zhì)量控制要點(diǎn)：

一、微生物學(xué)指標(biāo)樣品的采集環(huán)節(jié)質(zhì)量控制

1、采樣人員的資格

采樣人員經(jīng)過采樣技術(shù)培訓(xùn)并考核合格，經(jīng)檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)技術(shù)負(fù)責(zé)人授權(quán)后方可上崗，避免人員不規(guī)范的采樣活動。

2、采樣瓶的準(zhǔn)備

采樣的容器選用帶磨12瓶塞的玻璃瓶，確保清洗干凈后（如果是生活飲用水，則按500毫升水樣加入0.3毫升10％硫代硫酸鈉溶液除氯，地表水等其它不含氯的水樣則不需要加），用牛皮紙等防潮紙將瓶蓋和瓶頸包裹好并滅菌，可采用熱力滅菌和高壓蒸汽滅菌兩種。干熱滅菌要求160℃下維持2小時(shí)，高壓滅菌要求121℃下維持15分鐘，高壓蒸汽滅菌后的采樣瓶如不立即使用，應(yīng)于60℃將瓶內(nèi)冷凝水烘干。滅菌后的容器應(yīng)在2周內(nèi)使用，在滅菌瓶的牛皮紙上蓋上使用有效期限，并存放于標(biāo)識有“已滅絕”字樣的干燥箱或潔凈的專用柜內(nèi)。

3、按規(guī)范要求采集

檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)可以編寫《采樣管理程序》、《采樣技術(shù)規(guī)范》等體系文件指導(dǎo)采樣人員規(guī)范操作。在采樣現(xiàn)場，采樣人員要注意采樣地點(diǎn)周圍環(huán)境對樣品的影響，比如生活飲用水的采樣，要避免在廁所龍頭，因?yàn)閹h(huán)境中存在大量細(xì)菌，會在采用過程中污染樣品，造成樣品微生物指標(biāo)超標(biāo)的假象。所以當(dāng)環(huán)境條件不符合采樣要求時(shí)，應(yīng)采取更換采樣點(diǎn)或者終止采樣活動等措施。同一水源、同一時(shí)間采集幾類檢測指標(biāo)的水樣時(shí)，應(yīng)先采集供微生物學(xué)指標(biāo)檢測的水樣，采樣時(shí)應(yīng)直接采集，不得用水樣涮洗已滅菌的采樣瓶，并避免手指和其它物品對瓶口的污染。采集龍頭水樣時(shí)應(yīng)打開水龍頭放水?dāng)?shù)分鐘，確保排除滯留水帶來的影響，并對水龍頭進(jìn)行消毒后方可采集水樣；采集地表水樣時(shí)，用適當(dāng)?shù)娜萜魍度胨屑乘?，?yīng)注意不可攪動水底的層積物，也要注意不能混入漂浮于水面上的雜質(zhì)，再把水樣倒進(jìn)滅菌玻璃瓶中。

4、樣品運(yùn)輸要求

微生物樣品運(yùn)輸要求在0～4℃下避光保存，并在4小時(shí)內(nèi)檢測。

5、做好采集記錄登記

采樣人員必須填寫好《水樣現(xiàn)場采集記錄表》，現(xiàn)場記錄應(yīng)及時(shí)、客觀、準(zhǔn)確、信息齊全，字跡工整，記錄表隨樣品一起流轉(zhuǎn)到樣品管理員，結(jié)果有校核人簽名審核確認(rèn)。

二、微生物學(xué)指標(biāo)樣品的移交環(huán)節(jié)質(zhì)量控制

樣品運(yùn)送回檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)后，樣品管理員檢測確認(rèn)樣品完好無損后再簽收《水樣現(xiàn)場采集/檢測記錄表》，并在規(guī)定檢測時(shí)間內(nèi)下達(dá)檢測任務(wù)單。

三、微生物學(xué)指標(biāo)檢測環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制重點(diǎn)

1、檢測人員質(zhì)量控制

對從事微生物檢驗(yàn)檢測的人員，應(yīng)有相應(yīng)的教育、培訓(xùn)，可由檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)技術(shù)負(fù)責(zé)人考核并授權(quán)上崗，確保人員能勝任工作且受到監(jiān)督。在微生物檢測過程中，檢測人員在其中尤為重要，因?yàn)樵跇悠返奈『团囵B(yǎng)等過程中存在不穩(wěn)定性與隨機(jī)性，并且微生物檢測都是無菌操作技術(shù)，專業(yè)人員能最大程度避免手法不當(dāng)、樣品、環(huán)境等污染情況的發(fā)生，因此要求人員有較高的分析能力和扎實(shí)的操作技術(shù)，理論與實(shí)踐相結(jié)合，確保能勝任檢測工作。

2、檢測設(shè)備質(zhì)量控制

微生物檢測過程中使用到的設(shè)備包括：溫度計(jì)、溫度測量儀、高壓滅菌鍋、電熱干燥箱、電熱恒溫培養(yǎng)箱、隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱、電子天平等等，這些重要設(shè)備必須按周期送上級計(jì)量單位檢定／校準(zhǔn)，以避免設(shè)備帶來的檢測結(jié)果可疑。所有設(shè)備每次使用完畢，必須填寫《儀器使用記錄表》，培養(yǎng)箱和冰箱要有早晚兩次的溫控記錄。結(jié)合《實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)認(rèn)定能力評價(jià)檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)通用要求》和實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的具體要求，確保相關(guān)儀器設(shè)備性能滿足使用條件，比如培養(yǎng)箱對溫度要求就很高，若溫度波動大則無法達(dá)到恒溫效果，直接影響微生物的生長，所以要做好溫度監(jiān)控、記錄和修正等工作，否則溫度波動會造成檢測結(jié)果不可信。

3、檢測環(huán)境質(zhì)量控制

（1）潔凈室的環(huán)境質(zhì)量控制

微生物實(shí)驗(yàn)室布局應(yīng)合理，分區(qū)要清晰，要有準(zhǔn)備室、潔凈室、培養(yǎng)室，最大限度降低來回折返的概率，降低交叉污染等風(fēng)險(xiǎn)。潔凈室的操作環(huán)境對微生物檢測結(jié)果的影響很大，檢測應(yīng)遵循無菌操作，防止人員、環(huán)境對樣品的污染以及樣品間交叉污染。檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)可以編寫《微生物環(huán)境質(zhì)量控制規(guī)定》等相關(guān)體系文件指導(dǎo)日常工作開展。廣州開發(fā)區(qū)水質(zhì)檢測中心編寫的體系文件《微生物環(huán)境質(zhì)量控制規(guī)定》中對潔凈室做了一系列環(huán)境控制規(guī)定：進(jìn)入潔凈室人員必須穿戴無菌操作專用衣帽鞋及口罩，每天對上述物品進(jìn)行紫外燈照射，每周消毒水浸泡清洗；潔凈室每天檢測前要開啟紫外燈照射滅菌30分鐘，并開啟空氣凈化系統(tǒng)1小時(shí)以上，每周用“84消毒液”擦拭工作臺、其他器皿、燈管、門窗和地板，最后開啟空氣凈化系統(tǒng)1-2小時(shí)候后，在無人狀態(tài)下開啟紫外燈10分鐘進(jìn)行滅菌；每月用生長有200～250個(gè)細(xì)菌菌落的瓊脂培養(yǎng)皿暴露于紫外燈下2分鐘，99％的菌落被殺滅，否則，應(yīng)更換紫外燈；每月檢測沉降菌，根據(jù)結(jié)果判定潔凈室環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來評估潔凈室的潔凈度

（2）儀器設(shè)備表面滅菌效果質(zhì)量控制

對于無菌室中的工作臺、墻壁、擺放的各種物件及培養(yǎng)箱、冰箱內(nèi)壁的表面滅菌效果要做監(jiān)測，頻率可以每月一次，檢測其是否受到污染。

4、檢測試劑、器皿等質(zhì)量控制

從有資質(zhì)的供應(yīng)商購買合格的試劑，并對每批新購進(jìn)的培養(yǎng)基等重要物資進(jìn)行驗(yàn)收，驗(yàn)收合格后，嚴(yán)格按照供應(yīng)商提供的儲存條件、有效期和使用方法進(jìn)行保存和使用。應(yīng)對配制好的培養(yǎng)基、無菌水、移液管、培養(yǎng)皿等進(jìn)行滅菌效果核查。所有配制好的培養(yǎng)基、無菌水等試劑都應(yīng)該標(biāo)識好名稱，日期，有效期、配置人等信息。

5、檢測內(nèi)外部質(zhì)量控制

每批微生物樣品必須包含有空白樣品、運(yùn)輸空白樣品、平行樣品的檢測，以便排查出現(xiàn)可疑結(jié)果時(shí)的原因。檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)應(yīng)制定微生物的質(zhì)量控制計(jì)劃，內(nèi)部質(zhì)量控制可采用人員比對、方法比對、購買菌株質(zhì)控樣品考核、人員監(jiān)督等手段，外部質(zhì)量控制可采用參加權(quán)威機(jī)構(gòu)組織的能力驗(yàn)證或?qū)嶒?yàn)室間比對等手段。為保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確可靠，可以多途徑多手段進(jìn)行質(zhì)量控制。

6、全程有記錄

貫穿檢測活動的所有動作，都應(yīng)該及時(shí)、真實(shí)地做好記錄工作，做到結(jié)果可查，過程可追溯。

四、微生物學(xué)指標(biāo)檢測結(jié)果的校核和報(bào)告環(huán)節(jié)質(zhì)量控制

1、校核

微生物檢測結(jié)果出來后，交由相關(guān)人員校核簽名。需要注意生活飲用水中往往微生物樣品濃度都很低甚至沒有檢出，有時(shí)候微生物樣品濃度較低時(shí)，會對檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性造成影響，可能出現(xiàn)不符合菌落總數(shù)≥總大腸菌群蘭耐熱大腸菌群≥大腸埃希氏菌規(guī)律的現(xiàn)象，需要對上述問題制定針對性的質(zhì)量控制方案。

2、報(bào)告簽發(fā)

報(bào)告經(jīng)相關(guān)人員校核后，由授權(quán)簽字人簽發(fā)報(bào)告。授權(quán)簽字人根據(jù)《實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)認(rèn)定能力評價(jià)檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)通用要求》的要求，也應(yīng)具備微生物學(xué)授權(quán)簽字領(lǐng)域的專業(yè)技術(shù)能力，熟悉相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和文件，還應(yīng)熟悉報(bào)告或證書使用標(biāo)志和專用章的要求。

五、總結(jié)

綜上所述，水質(zhì)環(huán)境微生物檢測的質(zhì)量控制人、機(jī)、料、法、環(huán)、測六大要素與檢測過程中各個(gè)環(huán)節(jié)緊密相連，只有對檢測過程涉及的每個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化管理和有效的細(xì)節(jié)控制，才能確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，檢測結(jié)果的出具才會合理可信。

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