在當前的食品檢測工作中，微生物檢測是重中之重，為了獲得更為精準的食品安全檢測結果，多種食品檢測技術在不斷發(fā)展，本文主要對核酸探針檢測技術進行分析，此項技術能夠在短時間內(nèi)找到食品內(nèi)部存在的有毒物質，通過對該技術的應用分析，希望為更多食品檢測工作提供參考建議。

1前言

微生物泛濫不僅會出現(xiàn)多種致病菌，更會產(chǎn)生嚴重的食品安全事故，嚴重時還會威脅人們的生命安全。核酸探針檢測技術不僅具有極高的精準度，更能降低食品檢測經(jīng)費與時間，便捷的檢測方式使其得到廣泛應用并迅速發(fā)展。

2核酸探針基本概述

對核酸探針這一全新檢測方式加以分析，此種檢測方式的主要部分為RNA探針，RNA探針帶有指示標記，能夠與被檢測食品核苷酸序列的一段單鏈cDNA或是cRNA分子相互結合。在檢測過程中，主要以特異性cDNA、cRNA與人工合成的寡核苷酸探針為主。核酸探針應用范圍較為廣泛，由于RNA為單鏈分子，在檢測工作中，能夠與被檢測食品靶序列迅速反應，此類雜交反應效率較高，具有較為顯著的應用效果。

3核酸探針的制備工作

在食品檢測工作中，借助基因檢測方式可以了解樣品的位置與序列。此類食品檢測方式，能夠在探針輔助下，在最短時間內(nèi)得到不同被檢測食品的基因信息，并判斷基因信息來源是否相同。要想確保檢測工作的順利開展，應確保核酸探針充分發(fā)揮作用。在核酸探針制備工作中，應重點關注以下2項內(nèi)容。第一，應根據(jù)所選擇食品，借助交叉反應，對其中變化較為顯著的核酸片段進行分析。第二，應在制備前，明確食品內(nèi)部標記物，對常見標記物進行分析。在當前食品檢測工作中，主要通過32P、125I以及35S幾種同位素進行分析，并以此為基礎，進行核酸探針制備工作。

4核酸探針在當前食品檢測工作中的具體應用

4.1應用于DNA與RNA為靶向檢測方式

在食品檢測工作中，重點應關注以下3項指標。第一，菌落總數(shù)檢測工作。第二，大腸桿菌群和沙門菌的檢測工作。第三，霉菌、酵母與毒素的檢測工作。在這些檢測工作中，細菌來源種類多樣化。在具體檢測工作中，需結合DNA遺傳序列，開展檢測工作。并在檢測過程中，遵循生物特異性，對其中的DNA序列進行分析與對比，進而設計出合理的檢測方式。其次，以RNA為靶向目標的檢測試驗。此種檢測方式，多以AccuProbe基因為探針，在檢測工作中借助熒光物質，將標記特異性單鏈作為檢測探針，應用此種檢測方式，能夠與待測細菌中的核糖體形成RNA互補，進而形成相對穩(wěn)定的DNA與RNA雜交體。在具體檢測工作中，應選擇適合檢測樣品的試驗試劑，借助試劑將多余探針去除。在試驗后續(xù)階段，可以通過發(fā)光儀器設備，做好雜交標記工作。借助核酸探針，以RNA為靶向目標的檢測方式相對簡單，檢測用時較短，檢測正確率較高，應得到重視與推廣。

4.2核酸探針應用于水產(chǎn)品檢測工作

隨著食品種類不斷增加，核酸探針檢測技術已經(jīng)得到較為廣泛的應用，普遍應用于基因測序、食品檢測工作中。在以往的檢測工作中，顯微鏡檢測方式存在較大誤差，難以保證檢測結果的精確度。再加上不規(guī)范操作的影響，或是使用檢測試劑不合理，缺乏檢測經(jīng)驗，這些因素都會影響檢測結果。因此，可以借助核酸探針檢測方式，彌補傳統(tǒng)檢測方式的不足，應用科學檢測原理，不斷提升檢測結果的可信度。例如，在水資源與水產(chǎn)品檢測工作中，應以核酸檢測為基礎，對導致腹瀉的大腸桿菌進行檢測，在實際檢測工作中，可以借助ST基因片段，判斷水產(chǎn)品中是否含有此類物質。為確保相關水產(chǎn)品質量與安全，應在水產(chǎn)品銷售前，對水產(chǎn)品進行檢測。在水產(chǎn)品檢測工作中，可以應用核酸探針檢測方式，對水產(chǎn)品存在的過量微生物、細菌以及蠕蟲進行檢測與分析。結合核酸探針檢測所得技術數(shù)據(jù)，明確水產(chǎn)品中的生物特點，才能有效鑒別其中的有害成分，最終提升水產(chǎn)品檢測質量。要想維護水產(chǎn)品市場穩(wěn)定發(fā)展，為消費者提供更為優(yōu)質的產(chǎn)品，勢必要做好水產(chǎn)品檢測工作。

4.3核酸探針應用于肉制品檢測

在肉制品檢測工作中，常會檢測出牛巴貝斯蟲，此種寄生蟲具有較高傳染性，牛巴貝斯蟲病為原蟲病，多由泰勒焦蟲感染所致。由于此類寄生蟲寄生于病畜血細胞中，其檢測難度較大，為保證食品安全，禁止病畜出現(xiàn)在市場中，應借助DNA探針檢測方式，以核酸探針檢測為主，并結合皂素處理方式，解決不能回收全部蟲體的問題，進而提升核酸探針檢測的有效性和靈敏度。首先，在檢測工作中，應對畜禽血樣進行收集與處理，將血樣置于37℃水浴處理，確保血樣融化。吸取100μL血樣，在血樣中加水至500μL，冰浴10min，以3000r/min進行離心處理，離心時間10min。當血樣中的變性血紅蛋白逐漸沉淀后，將上述被測物質轉移至另一離心管中。與此同時，應對正常畜禽血液進行處理，借助健康畜禽白細胞對被測樣品進行冷藏與稀釋。每個稀釋后的血樣，相當于原血樣中的50μL。對這一血樣加以分析，稀釋過后的病畜血樣蟲量較大。因此，為保證檢測結果精確度，在本次檢測工作中，最終確定檢測稀釋度為500μL。

在血樣處理工作中，應采取以下3種方式，對血樣進行處理。

（1）皂素處理方法，在上述血樣中加入皂素，將皂素濃度控制在0.15%，并在處理完成后，在其中加入10mg氯化鈉（NaCl）與0.5mg乙二胺四乙酸（EDTA）。將血樣濃度控制在150mM與10mM中。在后續(xù)試驗中，將血樣在室內(nèi)放置15min，在1×104r/min下進行離心處理，并將離心時間控制在5min。棄上相，并加入50μL去離子水，做好沉淀處理工作。

（2）可以借助乙酸處理方式，在上述稀釋液中加入細胞裂解液，并補加10mgNaCl，在沉淀過程中，借助TEPH7.6懸浮液，5000rpm離心5min，棄上相，采取重復洗滌方式，得到去離子的懸浮沉淀物質。

（3）蟲體消化方式，在提取蟲體DNA后，應用乙醇過濾，借助離心方式，收取蟲體DNA。在完成上述步驟后，借助點雜交方式進行試驗，并對核酸探針檢測結果加以分析，得到精準檢驗結果，保證食品安全與質量。

5討論

食品安全問題尤為重要，近些年，食品安全問題頻發(fā)，嚴重影響人們的健康與生活。在當前食品檢測過程中，常見的是微生物污染問題，應借助核酸探針檢測方式，及時發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品內(nèi)部存在的問題，從源頭上加以管控，最大限度降低質量問題，為更多食品安全檢測工作的開展打下堅實基礎。

聲明：本文所用圖片、文字來源《質量安全與檢驗檢測》2020年第5期，版權歸原作者所有。如涉及作品內(nèi)容、版權等問題，請與本網(wǎng)聯(lián)系

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